目的 探究顺铂(DDP)联合衣霉素(TM)对人神经母细胞瘤SH-SY5Y及SK-N-SH细胞的抑制作用及其机制。方法 将人神经母细胞瘤SH-SY5Y及SK-N-SH细胞分为对照组、TM组(0.4 mg/L TM处理24 h)、DDP组(4 mg/L DDP处理24 h)和DDP+TM组(0.4 mg/L TM+4 mg/L DDP共处理24 h)。采用CCK-8实验、平板克隆实验、划痕实验、Transwell实验分别检测各组细胞的细胞活力、增殖能力、迁移能力和侵袭能力,采用免疫印迹法检测各组细胞中JAK2-STAT3-HIF1α通路相关蛋白JAK-2、p-JAK2、STAT3、p-STAT3和HIF1α的表达水平。结果 实验结果显示,DDP+TM组两种细胞的细胞活力、增殖能力、侵袭能力、第12及24小时时的迁移能力及JAK2-STAT3-HIF1α通路各蛋白表达水平均显著低于其他三组(tLSD=2.14~78.95,P<0.05)。结论 DDP联合TM可通过JAK2-STAT3-HIF1α通路抑制神经母细胞瘤的增殖和迁移,该结果为神经母细胞瘤的治疗提供了新思路。
目的 探究tRNA衍生的小RNA(tsRNA)对小鼠心肌细胞铁死亡的调控作用及其机制。方法 采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测8周龄C57BL/6J小鼠心脏、肝脏、脾脏、肾脏、大脑、肌肉中5'tRF-LysCTT的相对表达水平。将原代心肌细胞分为A~D组,A组细胞使用完全培养基培养60 h,B组先使用完全培养基培养24 h,再依次进行饥饿处理12 h,H/R处理24 h,C组和D组细胞分别转染antagomir-NC和antagomir-5'tRF-LysCTT,并于转染24 h后再依次进行饥饿(12 h)和H/R处理(12 h);将原代心肌细胞分为E~G组,E组细胞使用完全培养基培养24 h,F组细胞转染agomir-NC 24 h,G组心肌细胞转染agomir-5'tRF-LysCTT 24 h。采用RT-qPCR检测A~G组小鼠心肌细胞中5'tRF-LysCTT和Ptgs2、Gpx4、Slc7a11的相对表达水平,分别采用亚铁离子比色法测试盒、脂质活性氧(ROS)染色、CCK8试剂盒检测A~G组小鼠心肌细胞内亚铁离子相对水平、ROS水平及心肌细胞的存活率,采用普鲁士蓝染色试剂盒观察A~G组小鼠心肌细胞内铁离子沉积情况。结果 RT-qPCR检测结果显示,与肝脏、脾脏、肾脏、大脑、肌肉中相比较,小鼠心脏中5'tRF-LysCTT表达水平最高(F=16.21,t=3.81~7.93,P<0.05)。D组与B组相比,心肌细胞内5'tRF-LysCTT和Ptgs2相对表达水平降低、Gpx4以及Slc7a11相对表达水平升高、亚铁离子相对水平和ROS水平降低,心肌细胞的细胞存活率升高(t=3.26~15.61,P<0.05),细胞内铁离子沉积明显增多,而C组与B组相比,细胞内的上述指标的水平差异无显著性(P>0.05)。G组与E组相比,心肌细胞内5'tRF-LysCTT和Ptgs2相对表达水平升高、Gpx4和Slc7a11相对表达水平降低、亚铁离子相对水平和ROS水平升高,心肌细胞的细胞存活率降低(t=3.57~91.84,P<0.05),细胞内铁离子沉积明显减少,而F组与E组相比,细胞内的上述指标的水平比较差异无显著性(P>0.05)。结论 5'tRF-LysCTT对于小鼠心肌细胞铁死亡具有调控作用,敲低细胞内5'tRF-LysCTT可以抑制H/R诱导的心肌细胞铁死亡,而过表达5'tRF-LysCTT可促进心肌细胞铁死亡的发生。
目的 评估低剂量及标准剂量伏诺拉生四联方案治疗幽门螺杆菌(Hp)的效果、安全性、经济学效益及患者依从性。方法 选择2023年3—8月在我院确诊Hp感染的531例患者,按所受治疗药物不同分为艾司奥美拉唑(Ebid)组(口服艾司奥美拉唑20 mg,2次/d),标准剂量伏诺拉生(Vbid)组(口服伏诺拉生20 mg,2次/d)及低剂量伏诺拉生(Vqd)组(口服用伏诺拉生20 mg,1次/d),各组患者Hp四联治疗的其余3种药物相同(口服阿莫西林1 000 mg,克拉霉素500 mg,枸橼酸铋钾600 mg,均2次/d),疗程14 d。所有患者停药4周后检查Hp根除率[按意向(ITT)分析及按方案(PP)分析]、症状好转情况、不良事件发生情况及患者依从性,对各组方案进行成本-效果分析(行ITT及PP分析)。结果 三组患者Hp根除率在ITT及PP分析中均有差异显著(χ2ITT=6.351,PITT<0.05;χ2PP=7.376,PPP<0.05),且Vbid组根除率均明显优于Ebid组(χ2ITT=6.077,PITT<0.016;χ2PP=6.821,PPP<0.016)。三组方案均获得较高的症状好转率,但组间无显著差异(P>0.05)。各组发生的不良事件均较轻微,其中Vqd组不良事件发生率显著低于Ebid组(χ2=6.058,P<0.016)。三组患者依从率无显著差异(P>0.05),但均超过95%。ITT及PP分析Vqd组的成本-效果比均低于Vbid、Ebid组。结论 低剂量伏诺拉生四联方案与标准剂量疗效相当(两者均优于艾司奥美拉唑四联方案),但具有更好的安全性及成本效益,值得在临床Hp根除治疗中推广。
目的 探讨4-羟基扁桃酸(4-HMA)对氧糖剥夺/复氧(OGD/R)致神经元细胞损伤以及大脑中动脉栓塞/再灌注(MCAO/R)致小鼠脑组织损伤的保护作用及其机制。方法 提取原代神经元细胞,设立对照组(神经元培养基培养)、OGD/R组(OGD/R处理)及OGD/R+4-HMA组(给予OGD/R处理+4-HMA干预)。在各组细胞培养6 h后,采用Western blot法检测各组神经元细胞中白蛋白激酶B(Akt)和磷酸化Akt(p-Akt)的水平,通过CCK-8实验检测各组细胞的细胞活力。将C57BL/6小鼠随机分为Sham组、MCAO/R组及MCAO/R+4-HMA组,每组6只。Sham组小鼠仅颈外动脉造口,但不阻塞其大脑中动脉;MCAO/R组和MCAO/R+4-HMA组小鼠均进行MCAO手术,栓塞大脑中动脉1.5 h恢复血流,MCAO/R+4-HMA组小鼠分别于血流恢复0、3 h时腹腔注射4-HMA,MCAO/R组小鼠不做任何处理。采用TTC染色法测定各组小鼠的脑梗死体积百分比并计算梗死区域占总脑体积百分比,并通过小鼠改良神经损伤评分(mNSS)对小鼠行为学进行评估。结果 OGD/R、OGD/R+4-HMA组与对照组比较,细胞中p-Akt相对表达量、p-Akt/Akt比值显著性增高(F=10.49、8.87,tLSD=3.02~3.14,P<0.05),Akt相对表达量差异无显著性(P>0.05)。OGD/R+4-HMA组的细胞活力明显高于OGD/R组(F=104.60,tLSD=7.28,P<0.05)。相较于MCAO/R组,MCAO/R+4-HMA组小鼠的mNSS分值和脑梗死体积百分比均显著降低(F=7.20、108.00,tLSD=3.32、5.41,P<0.05)。结论 4-HMA能够减轻OGD/R模型致神经元细胞的损伤,降低MCAO/R小鼠的脑梗死体积百分比,其作用机制可能与提高脑神经元细胞中p-Akt水平有关。
目的 探讨缝隙连接蛋白43(Cx43)在胆总管结扎(CBDL)引起的大鼠心肌损伤中的作用及其分子机制。方法 将18只SD大鼠随机分为假手术组、CBDL组及Cx43抑制剂组,每组6只。假手术组大鼠行胆总管游离术,CBDL组大鼠游离、结扎并切断胆总管,Cx43抑制剂组大鼠术前24 h通过尾静脉单次注射25 mg/kg的Gap 26后,游离、结扎并切断胆总管。三组大鼠饲养至术后第14天时采用心脏超声检查评估心脏射血分数(EF)、缩短分数(FS)和心率(HR);随后测定三组大鼠血清总胆红素(TBil)、苯丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶-MB(CK-MB)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性及丙二醛(MDA)水平;取三组大鼠心脏组织行HE染色和Masson染色;采用免疫印迹实验检测心脏组织中Cx43、Wnt 3α、β-catenin蛋白的水平。结果 心脏超声检查结果显示,CBDL组、Cx43抑制剂组大鼠心脏EF、FS、HR均显著低于假手术组(F=22.95~43.55,t=5.10~9.32,P<0.05)。血生化及氧化应激指标检测结果显示,与假手术组相比,CBDL组、Cx43抑制剂组大鼠血清中TBil、AST、ALT、LDH、CK-MB、MDA、GSH-PX水平显著升高,SOD的水平显著降低(F=19.29~100.60,t=3.67~13.72,P<0.05)。HE染色及Masson染色结果显示,CBDL组和Cx43抑制剂组大鼠发生心肌损伤及心肌间质纤维化。免疫印迹实验结果显示,与假手术组相比,CBDL组和Cx43抑制剂组大鼠心脏组织中Cx43水平显著下降,Wnt 3α、β-catenin水平显著升高(F=28.50~70.07,t=4.32~11.79,P<0.05);与CBDL组相比,Cx43抑制剂组大鼠心脏组织中Cx43水平显著下降,Wnt 3α、β-catenin水平显著升高(t=4.95~5.20,P<0.05)。结论 CBDL大鼠心脏组织中Cx43下调可负向调控激活Wnt 3α/β-catenin通路,导致大鼠心肌组织损伤加剧及心脏功能下降。
目的 探讨二氢杨梅素(DMY)对枸橼酸铁铵(FAC)导致的原代海马神经元细胞损伤的保护作用及其机制。方法 取出生24 h SD乳鼠的原代海马神经元进行体外培养,使用CCK-8法检测不同浓度DMY处理后的原代海马神经元细胞的活性,确定DMY给药浓度。将原代海马神经元细胞分为对照组(H组)、100 mmol/L浓度的DMY处理组(I组)、250 mmol/L浓度的FAC处理组(J组)、100 mmol/L浓度的DMY与250 mmol/L浓度的FAC共处理组(K组),使用流式细胞术检测各组细胞中活性氧(ROS)的含量,使用比色法检测各组细胞中丙二醛(MDA)的含量,采用Western blot方法检测各组细胞中的NF-E2相关因子2(Nrf2)、血红素加氧酶-1(HO-1)和谷胱甘肽过氧化酶4(GPX4)蛋白的表达水平。结果 CCK-8检测结果显示,在DMY浓度为100 mmol/L时,原代海马神经元细胞的存活率最高(F=9.95,P<0.05),故以该浓度用于后续实验。与H组相比,J组细胞中ROS和MDA含量明显升高(F=176.81、5 523.35,P<0.05);与J组相比,K组细胞中ROS含量和MDA含量明显降低(F=18.21、412.96,P<0.05)。与H组相比,J组细胞中Nrf2、HO-1、GPX4蛋白相对表达量明显降低(F=27.35~81.32,P<0.05);与J组相比,K组细胞中的Nrf2、HO-1、GPX4蛋白相对表达量明显升高(F=8.74~21.46,P<0.05)。结论 DMY可以缓解铁过载导致的原代海马神经元氧化应激损伤,其机制可能与其激活了原代海马神经元中的Nrf2-HO-1/GPX4通路有关。
目的 探究长链非编码RNA(lncRNA)AL365181.2在胆管癌(cholangiocarcinoma,CHOL)中的表达水平及其对CHOL细胞功能学的影响。方法 对肿瘤基因组图谱(TCGA)数据库中有关CHOL患者癌组织和癌旁组织的lncRNA AL365181.2表达情况的资料进行比较,对lncRNA AL365181.2表达水平与CHOL组织免疫细胞浸润情况的关系进行分析,并对lncRNA AL365181.2进行GSEA和KEGG富集分析。通过EdU实验、划痕实验、Transwell实验和裸鼠成瘤实验分别检测lncRNA AL365181.2对CHOL细胞增殖、迁移、侵袭和成瘤能力的影响。结果 对TCGA数据库所涉资料的分析结果显示,与癌旁组织相比,CHOL组织中lncRNA AL365181.2显著高表达(Z=4.00,P<0.05),且lncRNA AL365181.2与CHOL组织的记忆T细胞及树突状细胞浸润水平显著相关(r=0.28、-0.34,P<0.05);GSEA分析结果显示lncRNA AL365181.2在CHOL细胞免疫调节相关通路中显著富集,KEGG富集分析结果显示lncRNA AL365181.2在细胞因子受体互作通路和血管壁细胞表面互作通路中显著富集。体内外实验结果显示,敲低lncRNA AL365181.2后,CHOL细胞的增殖、迁移、侵袭及体内成瘤能力均显著降低(t=4.23~173.34,P<0.05)。结论 lncRNA AL365181.2在CHOL组织中较癌旁组织中高表达,并且表达水平与免疫细胞浸润程度密切相关;lncRNA AL365181.2的表达水平与CHOL细胞的增殖能力、迁移能力和侵袭能力密切相关。
目的 探讨血小板衍生生长因子(PDGF)对脉络膜黑色素瘤(choroidal melanoma,CM)细胞活性及侵袭能力的影响。方法 将CM细胞分为A、B组,分别转染空载体和敲降PDGF的慢病毒,采用RT-qPCR技术检测两组细胞中PDGF mRNA相对表达量,采用XTT实验检测两组细胞活性,采用Transwell实验检测两组细胞侵袭能力,采用Western blot实验检测两组细胞上皮-间质转化(EMT)及基质金属蛋白酶(MMPs)相关标志物蛋白的相对表达量。GEPIA数据库分析PDGF水平与CM患者预后的关系。结果 与A组比较,B组细胞中PDGF RNA相对表达量下降(t=176.30,P<0.05),细胞存活数目下降及侵袭能力减弱(F=57.21,t=14.10,P<0.05)。Western blot实验结果显示,与A组相比,B组细胞中E-cadherin相对表达量升高,N-cadherin、Snail、Vimentin、MMP9及MT1 MMP的相对表达量下降(t=4.13~14.14,P<0.05)。GEPIA数据库分析显示,PDGF-A、PDGF-B高表达与CM患者的不良预后有关(P<0.05)。结论 PDGF具有增强CM细胞活性,促进CM细胞侵袭的作用,其机制可能与诱导细胞EMT的发生有关。
目的 探究浸润性滤泡亚型甲状腺乳头状癌(infiltrative follicular papillary thyroid carcinoma,IF-PTC)患者BRAF基因V600E突变的危险因素。方法 选择2019年8月—2023年7月于我院手术治疗的IF-PTC患者134例,根据BRAF基因V600E突变情况分为突变组和非突变组。收集并比较两组患者的年龄、性别及是否合并桥本氏甲状腺炎,同时收集肿瘤病灶的数量、大小、边界、钙化、回声以及被膜侵犯、颈部淋巴结转移情况等指标,采用多因素logistic回归模型分析IF-PTC患者BRAF基因V600E突变的危险因素。结果 本研究中BRAF基因V600E突变患者构成比为67.16%。单因素分析结果显示,两组患者的年龄、病灶数量和被膜侵犯患者构成比差异显著(χ2=7.937~8.874,P<0.05)。多因素logistic回归模型分析显示,年龄≥55岁、肿瘤多灶和被膜侵犯均为IF-PTC患者BRAF基因V600E突变的独立危险因素(P<0.05)。结论 年龄≥55岁、肿瘤多灶和被膜侵犯是IF-PTC患者BRAF基因V600E突变的独立危险因素。
目的 探讨瑞香素(Dap)对胃癌细胞的抑制作用及其机制。方法 通过MTT实验检测浓度为0、30、60、90、120、150 μmol/L的Dap处理胃癌AGS细胞48 h后对细胞存活率的影响。将AGS细胞分为A~E组,分别用0、30、60、90、120、150 μmol/L的Dap培养48 h,通过光镜和结晶紫染色观察各组细胞数量和细胞形态的变化情况。DCF染色评估Dap对A~D组AGS细胞内活性氧(ROS)水平的影响。JC-1染色评估Dap对A~D组AGS细胞内线粒体膜电位(MMP)水平的影响。采用Western blot实验检测A~D组AGS细胞内LC3和P62蛋白的表达水平。通过Ad-mCherry-GFP-LC3B染色检测AGS细胞内自噬流的变化。结果 Dap以浓度依赖性的方式显著抑制AGS细胞的存活率(F=321.50,t=12.44~34.77,P<0.05),处理48 h时AGS细胞的IC50约为90 μmol/L。Dap处理48 h后,随Dap浓度的增加,A~E组AGS细胞数量逐渐减少,扭曲和皱缩形状的AGS细胞逐渐增多。随着Dap浓度的升高,A~D组AGS细胞内ROS水平逐渐增高。C和D组AGS细胞中JC-1绿色/红色荧光强度比值显著高于A组(F=10.92,t=3.09、4.96,P<0.05)。Western blot实验结果表明,B~D组与A组相比,细胞内LC3B/LC3A比值显著增高(F=36.46,t=3.17~9.78,P<0.05),P62的表达也显著升高(F=109.90,t=12.38~16.78,P<0.05)。Ad-mCherry-GFP-LC3B染色发现,Dap可抑制自噬小体与溶酶体的融合,导致自噬流阻断。结论 Dap能够抑制胃癌细胞的增殖,其作用机制可能与诱导胃癌细胞内ROS大量产生以及阻断自噬流有关。
目的 评估LVIS支架辅助Target弹簧圈栓塞颅内微小动脉瘤的临床效果。方法 回顾性分析2015年7月—2023年5月我中心采用LVIS支架辅助Target弹簧圈介入栓塞的47例微小动脉瘤患者的临床资料及随访结果。结果 47例患者术后即刻造影显示致密栓塞32例(68.1%),瘤颈残留11例(23.4%),部分栓塞4例(8.5%)。围手术期并发症4例(8.5%),包括2例破裂动脉瘤发生术中出血(1例死亡,1例致密栓塞后无明显后遗症),1例破裂动脉瘤术后合并颅内感染(抗感染治疗后无神经系统功能缺损),1例术中血栓形成(术中应用替罗非班后无神经系统功能缺损)。33例患者进行了影像学随访,其中动脉瘤完全闭塞29例(87.9%),动脉瘤稳定4例(12.1%)。随访过程中1例患者出院14 d后颞叶出血死亡,余患者无再出血发生。结论 LVIS支架辅助Target弹簧圈栓塞颅内微小动脉瘤较为安全、有效,适合在临床推广使用。
目的 探讨乳腺实性乳头状癌(solid papillary carcinoma,SPC)患者的临床特点、病理特征及预后。方法 回顾性分析2017年8月—2023年5月我院收治的144例乳腺SPC患者的临床资料,尤其是对肿瘤病理切片ER、PR、HER-2、Ki-67、p53、Syn、CK5/6、p63等病理指标的免疫组化检测结果进行分析。结果 144例患者中,女性患者142例,年龄(64.6±10.7)岁,肿瘤组织最大径中位数为8.0(4.3,19.0)cm。原位型SPC 62例,伴浸润性癌82例,出现同侧腋窝淋巴结转移3例。144例患者行免疫组化检测,其ER均为阳性表达,且HER-2为阴性表达,其中130例(92.2%)患者的Ki-67阳性率≤20%(呈Luminal A型免疫表型)。全部患者中29例进行保留乳房的乳腺癌切除术,94例接受全乳房切除术,21例进行乳腺癌改良根治术,98例患者术后辅助内分泌治疗。患者随访期中位数为31(16,58)个月,所有患者均未发生复发转移。结论 乳腺SPC是一类具有特殊组织学形态的低度恶性肿瘤,常表现为Luminal A型的免疫表型,治疗方法通常依据原位癌或相应浸润性癌进行手术及内分泌治疗,患者预后良好。
目的 探讨成人原位肝移植术后糖尿病(post-transplant diabetes mellitus,PTDM)发生的危险因素。方法 选择2017年7月1日—2023年1月31日我院原位肝移植手术患者293例,根据术后是否发生糖尿病分为PTDM组(66例)和非PTDM组(227例),收集两组患者的临床资料,对有差异的指标行多因素logistic回归分析成人PTDM发生的独立危险因素。绘制两组患者的Kaplan-Meier生存曲线,分析PTDM发生对患者生存率的影响。结果 患者PTDM的发生率为22.5%。两组患者的年龄、术前空腹血糖水平、术前血清总胆固醇水平、术前血清低密度脂蛋白水平、术后应用环孢素患者构成比、术后应用抗免疫排斥方案C(单用环孢素/环孢素联合麦考酚酯或西罗莫司)或D(单用麦考酚酯或西罗莫司)患者构成比、高血压史患者构成比差异显著(t=-3.191,U=-5.668~-2.559,χ2=3.922~5.689,P<0.05)。多因素logistic回归分析显示,年龄>46岁、高血压史、术前空腹血糖>6.1 mmol/L、术前血清低密度脂蛋白水平>3.12 mmol/L、术后应用抗免疫排斥方案C(单用环孢素/环孢素联合麦考酚酯或西罗莫司)是PTDM发生的独立危险因素。生存曲线分析结果显示,PTDM发生可降低患者的5年生存率(P<0.05)。结论 年龄>46岁、高血压史、术前空腹血糖>6.1 mmol/L、术前血清低密度脂蛋白水平>3.12 mmol/L、术后单用环孢素/环孢素联合麦考酚酯或西罗莫司的抗免疫排斥方案是成人PTDM发生的独立危险因素。
目的 基于相关数据库分析筛选肝细胞癌(HCC)脂质代谢相关转移风险基因,并联合其他临床危险因素构建患者的预后预测模型。方法 应用R软件从GEO数据库中获得原发性和转移性HCC患者的差异表达基因(DEGs),并筛选与患者预后相关的DEGs。将TCGA数据库中的HCC患者通过层次聚类分为两组,评估两组患者EMT评分、脂质代谢水平和预后。应用ICGC数据库中的数据再次对上述分析进行验证。应用LASSO回归模型筛选脂质代谢相关转移风险基因并进行风险评分,通过风险评分中位数分别将TCGA和ICGC数据库中HCC患者分为高、低危组,并分析患者的预后。应用单因素和多因素Cox回归分析获得影响HCC患者预后的独立危险因素,并构建列线图预后模型。采用Western blot和油红O染色检测应用脂质代谢抑制剂Fatostatin后Huh7细胞脂质代谢的情况;采用qPCR技术检测Huh7细胞中脂质代谢相关转移风险基因表达水平。结果 从GEO数据库中获得原发性和转移性HCC患者的DEGs共159个,其中65个DEGs与HCC患者的OS显著相关。通过EMT评分将TCGA数据库中聚类所得的两组HCC患者分别定义为高、低转移风险组。高转移风险组患者脂质代谢评分更高,OS更短。在ICGC数据库中验证的结果与TCGA数据库一致。应用LASSO回归模型筛选出脂质代谢相关转移风险基因,高危组OS更短。将脂质代谢相关转移风险基因与影响HCC患者预后的独立危险因素相结合,构建预后预测列线图模型。细胞实验证实,应用Fatostatin后,Huh7细胞的脂肪酸合酶表达降低,细胞内脂滴含量减少,多种脂质代谢相关转移风险基因表达发生变化。结论 基于数据库分析获得了13个脂质代谢相关转移风险基因,将这些基因和临床危险因素联合构建了HCC患者的预后预测模型,并通过细胞实验初步验证了脂质代谢相关转移风险基因与脂质代谢密切相关。
目的 探讨TLR3基因单核苷酸多态性与儿童过敏性紫癜(Henoch-Schönlein purpura,HSP)及紫癜性肾炎(Henoch-Schönlein purpura nephritis,HSPN)易感性的相关性。方法 选择HSP患儿174例作为病例组,选择同期体检的162例健康儿童作为对照组。根据病例组患儿在随访过程中是否合并肾脏损害分为HSP组、HSPN组。采用多重聚合酶链反应技术(M-PCR)靶向捕获TLR3基因rs35311343、rs121434431、rs199768900、rs768091235、rs1244010954位点,通过高通量测序技术对所有样本的上述位点进行测序,根据测序结果进行各位点基因型以及基因频率的统计分析。结果 病例组与对照组TLR3基因rs35311343、rs121434431、rs199768900、rs768091235、rs1244010954位点的各基因型频率和各等位基因频率比较,差异无显著意义(P>0.05)。病例组中HSP组与HSPN组TLR3基因rs121434431、rs199768900、rs768091235、rs1244010954位点的各基因型频率和各等位基因频率比较,差异无显著性(P>0.05);rs35311343位点的基因型频率与等位基因频率比较差异有显著性(χ2=9.492,OR=2.662,95%CI=1.342~5.281,P<0.05)。结论 TLR3基因rs35311343位点CG基因型与儿童过敏性紫癜肾脏受累有关,等位基因G可能是HSPN的易感基因。
目的 探究超声微血流成像(MFI)联合血清炎症因子对糖尿病肾病(diabetic kidney disease,DKD)早期诊断的价值。方法 选取2022年6月1日—2023年6月30日青岛大学附属医院收治的92例DKD患者为DKD组,另选取同期本院收治的64例2型糖尿病(T2DM)患者为T2DM组,收集两组患者的临床相关指标、超声血流参数以及血清炎症因子水平。超声血流参数包括MFI值、左肾叶间动脉阻力指数(RI1)、右肾叶间动脉阻力指数(RI2)、左肾叶间动脉峰值流速(PSV1)、右肾叶间动脉峰值流速(PSV2)。采用Spearman方法分析MFI值与临床指标、血清炎症因子的相关性,二元logistic回归中向前有条件的方法分析DKD的影响因素,以受试者工作特征(ROC)曲线分析MFI值和血清炎症因子对DKD的预测价值。结果 T2DM组RI1及血液中C-反应蛋白(CRP)、IL-6、IL-18水平低于DKD组(Z=-6.73~-3.20,P<0.05),而MFI值、PSV2水平高于DKD组(Z=-9.53、-2.67,P<0.05)。MFI值与血红蛋白(HB)水平、估算肾小球滤过率(eGFR)呈正相关,与血肌酐(Scr)、尿微量白蛋白肌酐比值(UACR)呈负相关;血清IL-6与Scr、UACR呈正相关,与HB、eGFR呈负相关。二元logistic回归分析显示,MFI值(OR=0.596,95%CI=0.473~0.751)、血清IL-6(OR=2.184,95%CI=1.243~3.839)均对DKD的诊断具有提示作用(P<0.05)。MFI值、血清IL-6单独诊断T2DM患者发生DKD的曲线下面积(AUC)分别为0.949(95%CI=0.909~0.989)、0.830(95%CI=0.767~0.892),两者联合诊断的AUC为0.970(95%CI=0.942~0.999)。结论 MFI值联合血清IL-6水平检测可提升DKD早期临床诊断率,可为DKD的监测和预防提供借鉴。
目的 制备大鼠心肌细胞H9C2的聚己内酯(PCL)/壳聚糖(CS)多元复合支架,并优选有利于H9C2细胞生长的支架。方法 通过静电纺丝法制备PCL/CS支架(支架A)、PCL/CS/氧化锌(ZnO)支架(支架B)、PCL/CS/ZnO/碳纳米管(CNTs)支架(支架C)三种多元复合支架,采用X射线衍射(XRD)、傅里叶红外光谱(FTIR)、热重分析(TG)、拉曼光谱测试等方法验证支架制备是否成功,采用电镜观察及拉伸应力、水接触角、电导率、膨胀率检测等方法评估三种支架的理化特性,采用DAPI染色、电镜观察、CCK-8实验等方法评估三种支架的生物相容性。结果 XRD、FTIR、TG、拉曼光谱测试结果显示三种支架制备成功。电镜观察结果显示支架C的纤维直径显著长于支架A、B(F=73.050,t=8.724、9.747,P<0.05);拉伸应力测试结果显示支架B的拉伸应力显著高于支架A、C(F=13.833,t=3.641、3.802,P<0.05);水接触角检测结果显示三种支架皆亲水;电导率测试结果显示支架B、C的电导率显著高于支架A(F=798.780,t=32.155、30.048,P<0.05);膨胀率测试结果显示,在PBS缓冲液中浸泡后,支架A第5小时膨胀率显著高于第0.5小时(F组内=53.103,P<0.05),支架C在第2~5小时中各时间点膨胀率显著高于第0.5小时(F组内=103.748,P<0.05);在第0.5~4小时中各时间点,支架A膨胀率显著高于支架B、C,在第0.5~2小时中各时间点,支架B膨胀率显著高于支架C(F组间=35.226~162.448,P<0.05)。DAPI染色及电镜图像结果显示,在三种支架上培养96 h以后,支架B、C表面H9C2细胞数量较支架A增多。CCK-8实验结果显示,支架A、B、C表面H9C2细胞在第18小时~第5天中各时间点的吸光度值均显著高于第12小时(F组内=37.159~67.083,P<0.05);在第12小时~第5天各时间点,支架C表面H9C2细胞的吸光度值均显著高于支架A、B(F组间=26.039~80.994,P<0.05)。结论 大鼠心肌细胞H9C2的多元复合支架符合细胞外基质特征,能够支持心肌细胞生长,其中PCL/CS/ZnO/CNTs支架显示出较高的生物相容性,比纯PCL/CS支架在心脏组织工程中更具应用潜力。